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細菌基因組DNA提取試劑盒 NobleRyder D0921

  • 型   號:
  • 價   格:
  • 更新時間:2024-08-28
  • 廠家性質(zhì):經(jīng)銷商

北京諾博萊德科技有限公司供應(yīng)細菌基因組DNA提取試劑盒 NobleRyder D0921量大優(yōu)惠,咨詢 :

 

 

 

 

 

 

 

 

 

細菌基因組DNA提取試劑盒 NobleRyder D0921

 

 

 

北京諾博萊德科技有限公司供應(yīng)細菌基因組DNA提取試劑盒 NobleRyder D0921量大優(yōu)惠,咨詢 :      1215878164

 

細菌基因組DNA提取試劑盒

 

試劑盒組成

50T

200T

保存溫度

RNaseA10mg/ml

500ul

2ml

-20

蛋白酶K10mg/ml

500ul

2ml

-20

溶菌酶

0.5g

 

 

2g

 

2-8

 

裂解液

12.5ml

50ml

RT

結(jié)合液

25ml

100ml

RT

玻璃奶

2.5

10ml

RT

TE緩沖液

10ml

30ml

RT

原理簡介
本試劑盒適合于常規(guī)革蘭氏陽性及陰性細菌基因組的提取。*的裂解緩沖液加上蛋白酶K等迅速去掉除DNA外的其他物質(zhì),并利用玻璃奶吸附DNA,進一步的去掉其他雜質(zhì),提取出來,得到的DNA可用于PCR/Real time-PCR,sequencing,Southern blot,mutant analysis,SNP 等下游應(yīng)用實驗。

注意事項
1.裂解液低溫時可能出現(xiàn)析出和沉淀,可以在熱水中溫浴幾分鐘幫助重新溶解,恢復澄清透明后冷卻到室溫即可使用。
2.避免試劑長時間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH值變化,各溶液使用后應(yīng)及時蓋緊蓋子。
3.
RNaseA經(jīng)常使用可放28度保存,蛋白酶K請放-20度保存。
4.同一樣本,如果想大量提取,可以增加樣本量,并且每一步試劑加量,但使用次數(shù)會成倍減少。

操作步驟
1.取100300ul培養(yǎng)的細菌(如果細菌濃度很高,請減少細胞用量),12,000rpm,離心2分鐘,盡可能的吸凈上清。如果細菌為革蘭氏陽性菌,請用溶菌酶處理,處理方法:稱取100mg溶菌酶,加入1ml 雙蒸水,溶解后,分裝成100ul/支,凍存,用時取出一支,直接加入*步收集的菌液中,重懸菌液,37度處理半小時,離心,去上清。如果為陰性菌,可跳過此步。
2. 加入250ul裂解液,立即震蕩混勻,加入10μl RNase A(10mg/ml)溶液,振蕩混勻,室溫放置5-10分鐘。
3.加入10μl蛋白酶K(10mg/ml)溶液,顛倒混勻,65℃水浴放置1030分鐘,期間顛倒35次,小心離心管蓋受熱開啟。
4.在上清中加入三倍體積無水乙醇,充分混勻。
512000rpm離心5分鐘,吸去上清,核酸在沉淀中。
6.沉淀中加入500ul結(jié)合液,65℃水浴1-2分鐘,核酸沉淀可溶解。
6.玻璃奶搖勻。加入50ul搖勻的玻璃奶,混勻,室溫放置2分鐘,10000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘,去上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振蕩混勻,10000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘,去上清,70%乙醇重復洗一次,再用無水乙醇洗一次。去上清,再次離心2分鐘,用小吸頭吸去上清。
7.室溫放置10分鐘(如果玻璃奶加量,請適當延長放置時間,此步為去除殘余酒精,以免影響下游實驗),加入50100ulTE緩沖液混勻溶解,65℃水浴5分鐘。離心,取上清為所提基因組。
8.電泳或者其他方法檢測,進入下游實驗。

 

 

 

 

 

 

 

北京諾博萊德科技有限公司位于北京市海淀區(qū),是一家專業(yè)從事生化試劑、分子生物學試劑、實驗耗材及實驗儀器研發(fā)、銷售、服務(wù)為一體的生物科技公司,公司主要經(jīng)營的進口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, FermantasMBI, NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等;產(chǎn)品涉及化工原料、生化試劑、分子克隆相關(guān)試劑、細胞培養(yǎng)及檢測常用試劑、實驗室常用耗材及儀器。

 

 

 

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